伪士的宁对人结肠癌HT-29细胞凋亡的影响及其机制研究(2)
2.3 伪士的宁对HT-29细胞线粒体跨膜电位的影响考察按“2.2”项下方法取HT-29细胞接种、培养、分组、加入相应药物并培养48 h后，收集细胞，以1 000 r/min离心5 min，除去上清液，用PBS洗涤细胞3次;以0.25%胰蛋白酶消化并收集细胞，以1 000 r/min离心5 min;弃去上清液，加入适量PBS重悬、润洗3次，收集不多于1X106个/mL的细胞，以JC-1工作液(取10 xlncubation Buffer，以灭菌水稀释成1xlncubation Buffer，预热至37℃;吸取线粒体膜电位检测试剂盒中的JC-1试剂1μL，加入1×Incubation Buffer 1 000 μL稀释，即得)1 000 μL混悬，在37℃、5%C02的培养箱中培养20 min;室温下以1 200r/min离心5 min，收集细胞，用1xlncubation Buffer润洗2次，再以lOxlncubation Buffer 200 μL重悬细胞后 ......
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